Субклинический мастит у коров — серьёзная проблема в молочном животноводстве, приводящая к значительным экономическим потерям из‑за снижения продуктивности стада и ухудшения качества молока. Ранняя диагностика и эффективная терапия этого заболевания — ключевые задачи современной ветеринарной медицины.

Перспективным подходом к диагностике является анализ активности трипсина в молоке и сыворотке крови.

Трипсин — фермент, способный проникать в воспалённые ткани, в том числе в молочную железу. Согласно результатам исследований, при мастите активность трипсина в молоке возрастает по сравнению с нормой примерно на 106,6 %, что позволяет использовать данный показатель в качестве маркера воспалительных процессов.

Для проведения анализа пробы свежеполученного молока доводят до комнатной температуры, после чего отбирают 200 мкл и центрифугируют на центрифуге (13 тыс. об/мин, 10 мин) с мембраной‑фильтром (100 КДа). Это позволяет отделить молекулы трипсина от жира и более крупных белков.

Далее выполняют определение активности трипсина на биохимическом анализаторе BioChem SA. Процедура включает следующие этапы:

1. В эппендорф набирают 450 мкл реагента 1.

2. Добавляют 10 мкл фильтрата и инкубируют 2–3 мин при 37 °C.

3. Добавляют 50 мкл реагента 2 (БАПНА) и определяют активность на приборе.

Анализатор регистрирует изменение оптической плотности и по калибровочной кривой рассчитывает активность трипсина (ед/л).

На всех этапах исследования соблюдаются меры контроля качества:

* используются одноразовые наконечники с фильтрами;

* проводятся отрицательный (без фильтрата) и положительный (со стандартным раствором трипсина) контроль;

* анализатор промывается после каждой серии измерений.

Преимущества метода

Предложенный метод отличается высокой чувствительностью в отношении скрытых форм мастита, которые не выявляются при использовании традиционных диагностических подходов. Для апробации методики в промышленных условиях требуется проведение масштабных исследований. Следующим этапом нашей работы станет производственный эксперимент, который позволит подтвердить достоверность полученных результатов и разработка препаратов.

Ожидаемые результаты реализации проекта

Успешная реализация проекта позволит достичь следующих результатов:

* повысить точность ранней диагностики скрытых маститов, что даст возможность начинать лечение до появления клинических признаков и предотвращать переход заболевания в хроническую форму;

* разработать препараты, которые снизят экономические потери, обусловленные маститами, и улучшат качество молока;

* создать инновационные продукты для ветеринарной медицины, способные занять устойчивую нишу на рынке.

На страницу проекта