Метод основан на культивировании микроорганизмов в микрообъемах лунок стандартных 96-луночных иммунологических планшетов в соответствии с предлагаемыми реагентами и средами. Реагенты и среды предлагаемые в настоящей методике являются стандартными для описания дифференциально-диагностических свойств культур и рутинных исследований, что позволяет использовать их для идентификации; внутрилабораторного контроля, и паспортизации штаммов при процедуре их депонирования или патентования.

Реагенты и среды в лунки иммунологического планшета вносят в виде бумажных дисков изготовленных из фильтровальной бумаги определенного типа, пропитанных определенными субстратами с индикаторами, которые изменяют изначальный цвет лунки, по сравнению с началом проведения теста. В ряде случаев для исследования различных биохимических особенностей предлагается ряд дополнительных реагентов которые позволяют исследовать не только сахаролитические способности штаммов микроорганизмов или их отношение к различным источникам углерода, но и реакцию Фогес-Проскаура. Устойчивость к желчи; отношение к ряду антибиотиков (пенициллинового ряда); способность к продукции пигментов или ряда экзо- или эндоферментов (типа уреазы, фосфатаз, амилаз, липаз, протеиназ, пектиназ, и проч.).

Бумажные диски импрегнированные указанными компонентами стабильны; позволяют экономично использовать различные дорогостоящие (в том числе импортные реагенты), позволяют значительно расширить число изучаемых дифференциально-диагностических признаков, используемых для рутинной идентификации популяций микроорганизмов.

Результаты биохимических реакций учитывают или по изменению цвета индикатора в соответствующей лунке или с помощью набора реактивов.

Метод позволяет производить определение как минимум 96 различных биохимических реакций у бактерий, причем время исследования значительно сокращено и составляет от 1:3 до 1:10 срока классических пробирочных анализов.

В основе метода лежит способность микроорганизмов утилизировать исследуемые субстраты с образованием продуктов обмена веществ, которые реагируя с индикаторами или специальными реагентами, вызывают изменение цвета индикатора, который согласно прилагаемой шкале позволяет точно идентифицировать ту или иную реакцию микроба.

Предлагаемая система позволяет:

• дифференцировать образование кислоты из углеводов (исследовать способность к образованию из углеводов кислых продуктов обмена веществ) или в случае если происходит защелачивание среды, то условно говорить о «подщелачивании среды» если используется среды Гисса содержащие пептоны; или том, что углевод «не утилизируется» если цвет индикатора не изменяется;
• изучать утилизацию широкого спектра органических кислот (в том числе и поллютантов и ирритантов (что особенно важно для экологических исследований);
• исследовать различные физиолого-биохимические признаки присущие как широко распространенным, так и небольшому числу штаммов бактерий.

На страницу проекта