Цель проекта:

Целью настоящего проекта является получение оригинального штамма-продуцента вируса гриппа типа А, который обладает следующими преимуществами:

• Антигенными характеристиками, позволяющими проводить реакцию торможения гемагглютинации для диагностики современных штаммов вируса гриппа.

• Нуклеотидными последовательностями генов HA и NA, обладающими более 95% идентичности с другими вирусами такого же субтипа, выделенными за последние 10 лет, что позволит использовать штамм как контрольный при проведении диагностики.

Задачи реализации проекта

Последовательно решаемыми задачами проекта являются:

1) Сбор полевого материала от диких перелетных птиц околоводного комплекса на территории Республики Дагестан.

2) Выделение чувствительной модели (развивающиеся куриные эмбрионы) гемагглютинирующих агентов.

3) Типирование гемагглютинирующего агента – идентификация вирусов гриппа типа А с помощью ПЦР.

4) Типирование вируса гриппа типа А с помощью сиквенирования (минимум определение нуклеотидных последовательностей генов HA и NA вируса гриппа).

5) Получение сыворотки крови чувствительных животных (курица или лабораторные мыши) против выделенного вируса гриппа типа А.

6) Разработка алгоритма проведения диагностики вирусов гриппа методами РТГА и ПЦР, используя выделенный вирус.

Ожидаемые результаты

Эффективная диагностика вирусов гриппа типа А требует комбинирования различных методов с использованием адекватных контролей (референс-штаммов), таких как анализ клинических симптомов (в том числе и гистологический анализ), выделение и наработка вирусного материала, серологический анализ, молекулярно-биологические методы на основе ПЦР.

Большинство референс-штаммов вирусов гриппа или отсутствуют из-за уникальности субтипа или сильно устарели (выделены давно и генетически несходны с циркулирующими в настоящее время). Очевидна необходимость создания современных референс-штаммов вируса гриппа разных субтипов для использования в диагностике методами РТГА и ПЦР.

Будет собран и изучен полевой материал от диких птиц околоводного комплекса, выделены и типированы вирусы гриппа типа А. Будет выбран уникальный современный штамм, предназначеный для приготовления антигенсодержащего препарата и сыворотки для серодиагностики гриппа определенного субтипа в реакции торможения гемагглютинации (РТГА), как компонента панели поликлональных сывороток к различным субтипам вируса гриппа А (H1-H18) для типирования вновь выделяемых из природы вариантов вируса гриппа в РТГА, а также выявления антител к вирусу гриппа в сыворотках крови диких животных для оценки популяционного иммунитета к вирусу гриппа данного субтипа. Также штамм может быть применен в качестве контрольного референс-штамма при проведении диагностических работ методом ПЦР.

Прогноз по рынку

На сегодняшний день в России на большинство субтипов вируса гриппа типа А коммерческого антигена и сыворотки для диагностики вируса в РТГА не существует. Основные коммерческие препараты рассчитаны на циркулирующие среди людей и сельскохозяйственных животных субтипы вируса гриппа (Н1, Н3, Н5, Н7, Н9 субтипы по гемагглютинину). Препараты, включающие другие субтипы вируса гриппа не производятся. Тем не менее, постоянно происходит эволюция вирусов гриппа, расширение видов-хозяев, межвидовой перенос субтипов. Существует настоятельная необходимость в создании как минимум компонента панели поликлональных сывороток к различным субтипам вируса гриппа А, а идеально – полной панели (H1-H18).

На страницу проекта